Πώς η στήλη Fortis Evosphere AQUA εξασφαλίζει αξιόπιστο προσδιορισμό της NDMA.
Τα τελευταία χρόνια, οι νιτροζαμίνες έχουν αναδειχθεί ως ένα από τα σημαντικότερα ζητήματα ποιότητας στη φαρμακευτική βιομηχανία. Οι ενώσεις αυτές, γνωστές για τη καρκινογόνο δράση τους, έχουν οδηγήσει σε πολυάριθμες ανακλήσεις φαρμάκων όπως η Valsartan, η Ranitidine και η Metformin
Τα τελευταία χρόνια, οι νιτροζαμίνες έχουν αναδειχθεί ως ένα από τα σημαντικότερα ζητήματα ποιότητας στη φαρμακευτική βιομηχανία. Οι ενώσεις αυτές, γνωστές για τη καρκινογόνο δράση τους, έχουν οδηγήσει σε πολυάριθμες ανακλήσεις φαρμάκων όπως η Valsartan, η Ranitidine και η Metformin
Μεταξύ αυτών, η N-νιτροζοδιμεθυλαμίνη (NDMA) αποτελεί τη μικρότερη πολική νιτροζαμίνη — γεγονός που καθιστά την ανάλυσή της ιδιαίτερα απαιτητική. Η NDMA εμφανίζει ασθενή κατακράτηση στις κλασικές C18 στήλες, ενώ συχνά συνεκλούεται με το N,N-διμεθυλοφορμαμίδιο (DMF), έναν κοινό διαλύτη και πιθανό πρόδρομο σχηματισμού της NDMA.
Το πρόβλημα οξύνεται καθώς το DMF μπορεί να βρίσκεται σε συγκεντρώσεις έως και ένα εκατομμύριο φορές υψηλότερες από την NDMA, προκαλώντας σοβαρές αναλυτικές παρεμβολές.
Το Αναλυτικό Πρόβλημα
Όταν η NDMA και το DMF συνεκλούουνται, οι αναλυτές έρχονται αντιμέτωποι με δύο κινδύνους:
Ψευδώς θετικά αποτελέσματα, λόγω ισοτοπικών παρεμβολών από ¹⁵N-DMF ή ¹³C-DMF, με σχεδόν ίδια μάζα με την NDMA.
Ψευδώς αρνητικά αποτελέσματα, εξαιτίας της καταστολής ιονισμού (ion suppression) από την υπερβολική παρουσία DMF.
Ακόμη και με όργανα υψηλής διακριτικής ικανότητας, το πρόβλημα δεν εξαλείφεται αν δεν υπάρχει σωστός χρωματογραφικός διαχωρισιμός. Η ομάδα της Merck έδειξε ότι χωρίς καθαρό διαχωρισμό, η ποσοτικοποίηση της NDMA μπορεί να αλλοιωθεί σημαντικά, ένα ρίσκο που κανένα QC εργαστήριο δεν μπορεί να δεχτεί.
Η Λύση της Fortis Evosphere AQUA
Για να αντιμετωπιστεί αυτή η πρόκληση, οι ερευνητές αξιολόγησαν διάφορες στήλες και κατέληξαν στην Fortis Evosphere AQUA.
Η συγκεκριμένη στήλη, με πολική τροποποίηση (polar end-capping) και πλήρη συμβατότητα για διαχωρισμό πολικών ενώσεων, εξασφαλίζει ισχυρή κατακράτηση για μικρά, υδρόφιλα μόρια όπως η NDMA. Στη μελέτη της Merck, η Evosphere AQUA εμφάνισε την καλύτερη διαχωριστική ικανότητα μεταξύ NDMA και DMF, ξεπερνώντας άλλες φάσεις όπως C18, δι-φαινυλίου από κορυφαίους κατασκευαστές.
Το αποτέλεσμα ήταν εντυπωσιακά ακόμα και όταν το DMF βρισκόταν σε συγκέντρωση 1.000.000× υψηλότερη από την NDMA.
Αξιολόγηση Στήλης
Η μέθοδος που αναπτύχθηκε και επικυρώθηκε με τη στήλη Fortis Evosphere AQUA πέτυχε εντυπωσιακά αποτελέσματα:
Όριο ανίχνευσης (LOD):
0,1 ng/mL (1 ng/g σε δείγμα Metformin)
Όριο ποσοτικοποίησης (LOQ):
0,3 ng/mL (3 ng/g σε δείγμα Metformin)
Εξαιρετική γραμμικότητα
R² = 1.000 με εσωτερικό πρότυπο
Ακρίβεια και επαναληψιμότητα
Πλήρως εντός των ορίων του ICH Q2(R2)
Το εντυπωσιακότερο είναι πως όλα αυτά επιτεύχθηκαν με ένα απλό single quadrupole όργανο (Waters QDa).
Γιατί έχει σημασία
Οι διεθνείς αρχές, όπως ο FDA και ο EMA, απαιτούν πλέον επιβεβαιωτικό έλεγχο NDMA σε κάθε περίπτωση όπου χρησιμοποιείται DMF στη συνθετική διαδικασία. Η ασφάλεια του ασθενούς και η ρυθμιστική συμμόρφωση είναι αδιαπραγμάτευτες
Η μέθοδος που βασίζεται στη στήλη Fortis Evosphere AQUA προσφέρει μια πρακτική, αξιόπιστη και προσαρμόσιμη λύση για εργαστήρια ποιοτικού ελέγχου. Ο διαχωρισμός εξασφαλίζει ποιοτικό και ποσοτικό προσδιορισμό χωρίς παρεμβολές ή καταστολή σήματος ακόμα και σε πολύπλοκες μήτρες όπως η Metformin.